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MRS肉汤培养基的背景与应用!

2022-01-18作者:百欧博伟浏览次数:10  来源:北京百欧博伟生物技术有限公司

MRS肉汤培养基的背景与应用!

 

一、背景

 

MRS肉汤培养基(Lactobacilli MRS Broth),是弱选择性培养基,支持乳酸菌的旺盛生长。

 

1、MRS培养基工作原理

 

蛋白胨提供氮源。牛肉浸粉和酵母提取物作为维生素来源。葡萄糖是可发酵的碳水化合物。培养基的微酸性环境,有利于乳酸杆菌的生长。乙酸钠和柠檬酸铵是选择剂,同时也是能量物质。乙酸钠对革兰氏阴性细菌和霉菌有抑制作用,但对乳酸杆菌无影响。硫酸镁和硫酸锰提供代谢必需的离子。司班80或吐温80是非离子型表面活性剂,辅助乳杆菌对营养物质的利用。

 

2、MRS培养基用途

 

MRS肉汤培养基根据DeMan、Rogosa和Sharpe法用于各种材料中乳酸菌菌种的增菌、培养和分离。

 

乳酸菌MRS肉汤和MRS琼脂培养基(MRS固体培养基)也能用于乳杆菌鉴定中的检测实验。

 

3、MRS培养基配方(成分g/L)

 

蛋白胨 10.0;牛肉提取物 10.0;酵母提取物 5.0;葡萄糖 20.0

 

柠檬酸三铵 2.0;乙酸钠 5.0;MgSO4 0.1;MnSO4 0.05;K2HPO4 2.0

 

吐温80 1.0。

 

4、MRS培养基配制方法

 

⑴称取55g本产品,加入1000ml纯水重悬。

 

⑵调节pH。

 

⑶121°C灭菌15min。

 

5、MRS培养基结果与分析

 

乳杆菌的生长表现为培养基变浑浊。由于营养要求的不同,某些乳杆菌在该培养基上生长较差或不能生长。

 

二、MRS肉汤培养基的应用

 

用于降胆固醇乳酸菌的筛选及其降解机理研究:

 

在筛选出具有高降胆固醇能力的乳酸菌,研究该菌株的降胆固醇机理以及优化益生元与菌株结合的降胆固醇能力,并研究在人工胃肠道环境下该菌株的降胆固醇能力,为开发具有降胆固醇功能的乳制品提供理论指导。

 

首先通过选择性培养基平板涂布法从人体肠道、自制泡菜及海鱼肠道中筛选得到66株菌株,测定其体外去除胆固醇能力,并评价其耐酸性、耐胆盐性及胆盐水解酶(BSH)活性等生物学性能,再经生理生化鉴定得到具有高胆固醇去除率且生物学性能较好的乳酸菌。共获得14株胆固醇去除率为7-30%的乳酸菌,其中来源于人体肠道的编号为MPCF7-3菌株体外胆固醇去除率为23.29%,在0.3%的胆盐环境下及2h内在pH为2.0的环境中存活能力较好,经16S rDNA分子生物学鉴定为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)。

 

研究了植物乳杆菌MPCF7-3的降胆固醇机理,结果表明该菌去除胆固醇主要是通过共沉淀作用实现的,其次是菌体吸收作用,胆固醇掺入细胞膜的作用效果最小,三种途径的胆固醇去除率比重分别为56.78%、39.89%、3.35%。另外,该乳杆菌的休眠体细胞与热灭活细胞也能去除少量的胆固醇,去除率分别为2.54%与1.4%。

 

研究了将益生元与菌株结合促进体外降胆固醇能力的优化条件,用响应面设计法中的Box-Behnken法分析了某些益生元与胆盐浓度对植物乳杆菌MPCF7-3降胆固醇能力的影响。确定了优化条件为:牛胆盐、低聚果糖及山梨糖醇浓度分别为0.17%、0.90%与1.88%时,菌株胆固醇去除率为34.04%,与优化前相比提高了10.75%,且该响应面模型能很好地描述菌株胆固醇去除率与牛胆盐、低聚果糖及山梨糖醇的关系。

 

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